青光眼是全球第一位不可逆致盲性眼病，根据WHO报告显示，2020年全球青光眼患者达7600万，而中国占2200万^[1]。随着人口的老龄化，预计到2040年，全球青光眼患病人数将增加到1.118亿^[2]。病理性眼压升高是青光眼视神经损害的主要致病因素，目前临床治疗也主要侧重于控制眼压；然而，多种遗传、细胞和环境因素均会影响青光眼的发生和发展；因此，了解最终导致神经元死亡的各种机制对于开发有效的青光眼治疗方法就至关重要了。

青光眼动物模型对于研究青光眼病理生理学以及评价有潜力的治疗方法、药物至关重要。目前已有多种青光眼动物模型，常用的有：前房注射微球诱导高眼压模型^[3]、巩膜上静脉灼烧诱导高眼压模型^[4]、前房硅油注射诱导高眼压模型^[5]等。这些模型均以破坏房水外排途径为基础，诱导动物发生长期慢性的眼压升高，最终引起视神经损伤。

济世金编在前房注射微球诱导高眼压模型的基础上进行优化，建立了稳定的慢性高眼压小鼠的动物模型，可以用于青光眼的临床前研究和药理药效学评价。

慢性高眼压小鼠的构建及验证：

C57BL/6J小鼠经饲养适应后，进行前房磁珠注射造模。所有小鼠均采取右侧眼（OD）注射磁珠作为实验组，左侧眼（OS）注射PBS作为正常对照组。从造模后第四天开始，定期监测小鼠眼压。持续4周眼压监测，可见造模眼眼压显著升高，并稳定维持在20mmHg-25mmHg之间。（实验动物：C57/6J；周龄：12周；性别：不限）

图1. 慢性高眼压小鼠模型的构建

造模后4周，分离实验眼及对侧对照眼球，进行全视网膜铺片。利用RBPMS对RGC细胞进行染色，评估损伤情况。结果表明，实验组RGC数量在不同部位均显著低于对照组，显示出明显的损伤。

图2. 全视网膜铺片计数评估RGC损伤

同时，进行视神经横断切片的甲苯胺蓝染色，对视神经轴突计数。结果显示，实验组的视神经轴突也出现了显著的损伤。

图3. 视神经甲苯胺蓝染色评估轴突损伤

眼压慢性升高4周所引起的视神经损伤，仍是整个损伤的早期阶段。随着眼压的持续升高，视神经损伤将不断加重。该模型可以用于青光眼致病机制的研究以及相关视神经保护药物的评价。济世金编可以根据客户要求延长或缩短造模时间并获得实验所需的定制化青光眼慢性高眼压小鼠模型。

参考文献：

1. Quigley HA, Broman AT: The number of people with glaucoma worldwide in 2010 and 2020. Br J Ophthalmol 2006, 90(3):262-267.

2. Tham YC, Li X, Wong TY, Quigley HA, Aung T, Cheng CY: Global prevalence of glaucoma and projections of glaucoma burden through 2040: a systematic review and meta-analysis. Ophthalmology 2014, 121(11):2081-2090.

3. C.Jakobs T: Glaucoma: Methods and Protocol. 2018.

4. Gossman CA, Linn DM, Linn C: Glaucoma-inducing Procedure in an In Vivo Rat Model and Whole-mount Retina Preparation. J Vis Exp 2016(109).

5. Zhang J, Li L, Huang H, Fang F, Webber HC, Zhuang P, Liu L, Dalal R, Tang PH, Mahajan VB et al: Silicone oil-induced ocular hypertension and glaucomatous neurodegeneration in mouse. Elife 2019, 8.